近幾年來(lái)，關(guān)于糞便檢測(cè)的研究越來(lái)越多，但關(guān)于糞便自動(dòng)化檢測(cè)的綜述卻沒(méi)有。本人從事多年臨床工作后轉(zhuǎn)行從事檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)工作，在糞便自動(dòng)化檢測(cè)領(lǐng)域潛心工作了八年多，在此把本人的研究成果與大家分享，希望能起到拋磚引玉的結(jié)果。由于這是世界上第一篇關(guān)于糞便自動(dòng)化檢測(cè)的綜述，題目太大，本人能力有限，錯(cuò)誤之處在所難免，敬請(qǐng)讀者諒解并指正。鑒于本文關(guān)聯(lián)到許多公司，而且本人是糞便檢測(cè)自動(dòng)化產(chǎn)業(yè)的從業(yè)者，特別聲明：事關(guān)本人以及多家公司的聲譽(yù)譽(yù)，本著實(shí)事求是的原則，盡量展現(xiàn)糞便自動(dòng)化檢測(cè)的原貌；文中所引用多為網(wǎng)上查閱，需讀者自己核實(shí)，有不實(shí)之處，本人不承擔(dān)責(zé)任。另外，有些市場(chǎng)信息，通過(guò)普通的調(diào)查而來(lái)，筆者會(huì)用《可能、據(jù)說(shuō)》等提醒讀者，如有錯(cuò)誤，絕無(wú)誤導(dǎo)讀者之意圖。由于筆者專(zhuān)利知識(shí)以及相關(guān)的法律知識(shí)不足，也沒(méi)有權(quán)利對(duì)某些產(chǎn)品下定義，所以對(duì)于筆者不能確定是否會(huì)有知識(shí)產(chǎn)權(quán)糾紛的產(chǎn)品，未在本文中出現(xiàn)；由于目前許多公司開(kāi)始進(jìn)入糞便自動(dòng)化檢測(cè)領(lǐng)域，筆者不可能做到深入了解每一家公司，請(qǐng)勿對(duì)號(hào)入座。

1引言

糞便常規(guī)是臨床常規(guī)檢驗(yàn)三大項(xiàng)目之一，對(duì)了解消化道及相通器官（肝、膽、胰）有無(wú)病變（炎癥、出血、寄生蟲(chóng)感染）和胰腺、肝膽的消化與吸收功能有重要意義。糞便檢查具有診斷消化道疾病無(wú)創(chuàng)的特點(diǎn)，易被患者接受。但其檢測(cè)過(guò)程一直為手工操作，易造成交叉污染且檢出率較低，另因糞便的特殊氣味嚴(yán)重影響醫(yī)護(hù)人員工作環(huán)境，易引起抵觸心理。ISO15189質(zhì)量管理標(biāo)準(zhǔn)化認(rèn)證和人們對(duì)生物安全認(rèn)識(shí)的提高迫切要求醫(yī)院改善糞便檢查方法。隨著科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，自動(dòng)糞便分析儀器應(yīng)運(yùn)而生，為醫(yī)護(hù)人員和患者帶來(lái)福音。由于該類(lèi)產(chǎn)品尚處于初級(jí)階段，目前開(kāi)發(fā)此類(lèi)產(chǎn)品的多為小公司，尚無(wú)世界級(jí)巨頭開(kāi)展此類(lèi)項(xiàng)目，本文主要是對(duì)自動(dòng)糞便分析研究情況及其臨床應(yīng)用做一個(gè)簡(jiǎn)要的概述，供讀者參考。

2 計(jì)數(shù)池方法的發(fā)明及應(yīng)用

1997年 4月22日，Walter Greenfield申請(qǐng)了計(jì)數(shù)池（見(jiàn)圖一）的美國(guó)專(zhuān)利（15年），之后將該專(zhuān)利轉(zhuǎn)讓給美國(guó)Diasys Corpotation公司，Diasys Corpotation公司在此基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)出第一代自動(dòng)糞便分析儀器DiaSysFE-2 糞便分析工作站（以下簡(jiǎn)稱(chēng)FE-2工作站）。儀器自動(dòng)化計(jì)數(shù)池糞便鏡檢分析的應(yīng)用，使得傳統(tǒng)的人工操作的開(kāi)放式糞便鏡檢方法有成為過(guò)去的可能。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：DiaSys FE-2工作站是由獲專(zhuān)利的高清晰度優(yōu)質(zhì)玻璃制成的二個(gè)流動(dòng)計(jì)數(shù)室（O.S.A）、可調(diào)雙吸樣針、微電腦控制臺(tái)、自動(dòng)染色裝置、帶攝像的優(yōu)質(zhì)顯微鏡（選用內(nèi)置數(shù)碼位相差顯微鏡）以及電腦系統(tǒng)組成。

Parasep®糞便離心管

（附圖）

Parasep糞便離心管是一種快速一次性過(guò)濾器，三次過(guò)濾套環(huán)技術(shù)提供潔凈收集標(biāo)本和高效率濃縮寄生蟲(chóng)卵、幼蟲(chóng)、原生動(dòng)物包囊、球蟲(chóng)卵囊等。

Maxi Parasep®糞便離心管操作步驟

1．在6ml的混合室內(nèi)加入10％甲醛鹽水2.7ml，再加入乙酸乙酯0.8ml。

2．接上 3.5ml 的離心管，旋緊尖端朝上，搖晃或振蕩使其乳化。

3．?dāng)Q開(kāi)并扔掉混合室和過(guò)濾環(huán)，顛倒離心管，使其管尖向下，以 RCF 500g 速度離心 5min 或 RCF1000g速度離心1min。

4．除去脂肪物質(zhì)并倒掉沉渣上面的液體。

5．余下的糞沉渣用于檢驗(yàn)。

應(yīng)用于腸道寄生蟲(chóng)、幼蟲(chóng)、原蟲(chóng)、球蟲(chóng)卵囊、細(xì)胞、食物殘?jiān)臋z查，在CAP實(shí)驗(yàn)室認(rèn)證中起到了重要作用，但該儀器仍然存在一定的局限性。朱文彬等人將其與直接涂片鏡檢法比較發(fā)現(xiàn)FE-2工作站對(duì)于檢出寄生蟲(chóng)及細(xì)胞明顯優(yōu)于直接涂片鏡檢法，而直接涂片鏡檢法在脂肪球檢出率上比FE-2工作站法明顯優(yōu)越。

儀器特點(diǎn)：FE-2工作站采用甲醛消毒，乙酸乙酯去脂，離心沉淀急卵，采用標(biāo)準(zhǔn)計(jì)數(shù)池，進(jìn)行半定量分析結(jié)果，能相對(duì)提高部分寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵（例如蛔蟲(chóng)等小蟲(chóng)卵）的檢出率。但其不足之處也很明顯，因臨床檢驗(yàn)規(guī)程要求檢查三張涂片，本方法僅檢查15個(gè)視野，易漏檢；體積較大的寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵無(wú)法通過(guò)濾網(wǎng)，不同的寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵、包囊，滋養(yǎng)體的檢查方法不一樣易造成漏檢；僅檢驗(yàn)部分蟲(chóng)卵，不能檢查糞便的形態(tài)、形狀等。此產(chǎn)品在中國(guó)總代理為廣州華鑫科技有限公司共銷(xiāo)售近千臺(tái)，另外在土耳其也銷(xiāo)售了近300臺(tái)，據(jù)說(shuō)由于該公司產(chǎn)品一直沒(méi)有再優(yōu)化，目前已近停產(chǎn)。

3自動(dòng)糞便分析裝置研究進(jìn)程

由于計(jì)數(shù)池方法在糞便分析領(lǐng)域的應(yīng)用，國(guó)內(nèi)在2007年以后也出現(xiàn)了自動(dòng)糞便分析裝置的研究。經(jīng)過(guò)數(shù)年的發(fā)展，自動(dòng)糞便分析行業(yè)得到了蓬勃發(fā)展。在鏡檢方法上，有些公司研發(fā)了模擬人工涂片的自動(dòng)糞便分析儀。

3.1全自動(dòng)糞便分析裝置的首個(gè)中國(guó)專(zhuān)利

2007年6月12日合肥新月電子技術(shù)有限公司申請(qǐng)了全自動(dòng)糞便分析裝置的中國(guó)專(zhuān)利。獲取得國(guó)家科技部中小型企業(yè)創(chuàng)新基金支持，然而遺憾的是。據(jù)檢索相關(guān)產(chǎn)品一直沒(méi)有面市，未見(jiàn)到SFDA的注冊(cè)資料也未在展會(huì)或臨床機(jī)構(gòu)見(jiàn)到該企業(yè)的產(chǎn)品。

3.2大便標(biāo)本自動(dòng)混勻裝置和一次性標(biāo)本采集過(guò)濾裝置專(zhuān)利

緊接著3個(gè)月以后，濟(jì)南蘭潔生物技術(shù)有限公司申請(qǐng)了大便標(biāo)本自動(dòng)混勻裝置和一次性標(biāo)本采集過(guò)濾裝置二項(xiàng)專(zhuān)利，并研發(fā)出了相應(yīng)的產(chǎn)品LJ-2000型大便常規(guī)分析儀。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：用采集匙采集定量的大便標(biāo)本放入盛有定量稀釋液的采集杯中，橡膠塞封閉，然后利用轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)動(dòng)產(chǎn)生的離心力和標(biāo)本以及稀釋液自身的重力混勻。這種混勻方式遇到結(jié)實(shí)塊狀物，很難使標(biāo)本和稀釋液混勻充分。而且未涉及糞便性狀觀察?；靹蚝?，穿刺針穿透橡膠塞，自動(dòng)啟動(dòng)吸樣蠕動(dòng)泵，把稀釋混勻后的樣品經(jīng)過(guò)濾后被灌注到流動(dòng)計(jì)數(shù)池內(nèi)，完成送樣后，PC機(jī)自動(dòng)顯示鏡檢圖像。樣品過(guò)濾采用的是上下過(guò)濾方式，這樣的過(guò)濾方式極易造成漏液和堵塞引起儀器故障。鏡檢完成后儀器自動(dòng)進(jìn)入沖洗流程，完成對(duì)管道內(nèi)、流動(dòng)計(jì)數(shù)池和穿刺針內(nèi)殘留標(biāo)本的清洗，清洗完畢后，準(zhǔn)備下一個(gè)標(biāo)本的檢測(cè)，周而復(fù)始，每一輪次20個(gè)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：LJ-2000型大便常規(guī)分析儀基本上實(shí)現(xiàn)了糞便分析從人工到機(jī)器的轉(zhuǎn)變。標(biāo)本完全在密閉系統(tǒng)中進(jìn)行檢測(cè)，避免了標(biāo)本對(duì)人體的接觸感染。檢測(cè)后的殘留物仍處于密封系統(tǒng)中，方便處理，減少了對(duì)環(huán)境的污染。但產(chǎn)品不能觀察糞便的顏色、形狀等指標(biāo)，由于設(shè)計(jì)或工藝等原因，有時(shí)有糞便泄露，造成部分檢驗(yàn)人員的抵觸。其自動(dòng)化程度還較低，必須人工操作，每小時(shí)僅能測(cè)試20個(gè)標(biāo)本，對(duì)于醫(yī)院龐大的測(cè)試需求，測(cè)試效率有待提高。據(jù)說(shuō)LJ-2000型大便常規(guī)分析儀生產(chǎn)并銷(xiāo)售了近百臺(tái)后停產(chǎn)。

3.3大便標(biāo)本自動(dòng)檢測(cè)儀及相關(guān)專(zhuān)利

在 2009年2月19日，上海吉鴻生物科技有限公司申請(qǐng)了大便標(biāo)本自動(dòng)檢測(cè)儀的發(fā)明專(zhuān)利以及標(biāo)本盒的發(fā)明專(zhuān)利，之后將專(zhuān)利轉(zhuǎn)讓給蘇州海路生物技術(shù)有限公司，目前此項(xiàng)專(zhuān)利已經(jīng)獲得中國(guó)，日本/歐美部分國(guó)家的授權(quán)。蘇州海路生物技術(shù)公司，在此基礎(chǔ)上對(duì)儀器進(jìn)行改進(jìn)，又申請(qǐng)了多項(xiàng)技術(shù)專(zhuān)利包括從產(chǎn)品外觀到樣本盒、檢測(cè)試劑卡等的改造。機(jī)械加樣、攪拌結(jié)構(gòu)部分是海路公司獨(dú)有知識(shí)產(chǎn)權(quán)。蘇州海路系列自動(dòng)糞便分析儀，經(jīng)過(guò)5年的發(fā)展，基本解決了自動(dòng)糞便分析裝置在使用過(guò)程中存在的突出問(wèn)題。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介及特點(diǎn)：自動(dòng)化程度高，從稀釋、高速機(jī)械攪拌混勻、過(guò)濾分離標(biāo)本、集卵、灌注計(jì)數(shù)池、加樣到拍照，再到檢測(cè)糞便隱血、輪狀病毒等項(xiàng)目全部實(shí)現(xiàn)機(jī)器自動(dòng)完成，并且可連續(xù)進(jìn)樣和與其他儀器聯(lián)機(jī)操作，每小時(shí)可處理120個(gè)標(biāo)本，完成800個(gè)測(cè)試，能滿(mǎn)足大型三級(jí)醫(yī)院和體檢中心的需求。標(biāo)本、管路、儀器、廢物全密閉，檢測(cè)過(guò)程全密閉，自動(dòng)排出廢液，檢驗(yàn)人員不直接接觸標(biāo)本，無(wú)污染，同時(shí)提高實(shí)驗(yàn)室生物安全性，改善實(shí)驗(yàn)室工作環(huán)境。除此之外，它擁有多個(gè)快速免疫學(xué)試劑通道，可自動(dòng)完成多種快速免疫學(xué)試驗(yàn)。這為更全面和準(zhǔn)確的對(duì)糞便進(jìn)行分析提供了更準(zhǔn)確的診斷依據(jù)。雖然目前產(chǎn)品能夠基本滿(mǎn)足實(shí)際需求，但產(chǎn)品仍然存在需改進(jìn)之處：不同疾病具有不同的特點(diǎn)，即使同一類(lèi)疾病，其檢測(cè)方法也需要不同，該產(chǎn)品還需要進(jìn)一步的細(xì)化，并增加分子診斷等檢測(cè)技術(shù)。

令人欣喜的是，蘇州海路生物技術(shù)有限公司已經(jīng)獲得二項(xiàng)歐美專(zhuān)利授權(quán)，還有一項(xiàng)在審核中。這應(yīng)該是我們國(guó)家在IVD領(lǐng)域突破性的進(jìn)展。該產(chǎn)品在國(guó)內(nèi)各地醫(yī)院都可以見(jiàn)到，2014年國(guó)內(nèi)銷(xiāo)售約300臺(tái)。在此不展開(kāi)討論。

3.4自動(dòng)操作糞便檢驗(yàn)儀專(zhuān)利

2011年 4月29日襄陽(yáng)市科瑞杰醫(yī)療器械有限公司申請(qǐng)了自動(dòng)操作糞便檢驗(yàn)儀（見(jiàn)圖五）專(zhuān)利。此產(chǎn)品完全模仿手工，檢測(cè)速度20余個(gè)標(biāo)本/小時(shí)儀器，成本較高；在設(shè)計(jì)方面，儀器內(nèi)部的采樣工作需要手工操作，有一些問(wèn)題需要改進(jìn)問(wèn)題，其采樣方法，標(biāo)本處理方式和膠體金試劑的處理方式都存在爭(zhēng)議。網(wǎng)上可以的信息該公司在 2013年8月專(zhuān)利質(zhì)押貸款300萬(wàn)，據(jù)說(shuō)在2014年引進(jìn)投資2000萬(wàn)元在改進(jìn)產(chǎn)品。目前在使用的醫(yī)院不多，筆者未見(jiàn)到，具體使用情況不詳。

3.5 其他自動(dòng)糞便分析裝置

2012年8月，浙江世紀(jì)康大醫(yī)療科技有限公司申請(qǐng)了關(guān)于自動(dòng)糞便分析系統(tǒng)的發(fā)明專(zhuān)利，據(jù)檢索，未見(jiàn)相關(guān)產(chǎn)品進(jìn)入市場(chǎng)。其余申請(qǐng)與糞便檢測(cè)有關(guān)的實(shí)用新型或外觀專(zhuān)利，筆者沒(méi)有能力鑒定期價(jià)值，不在此一一追溯。

3.6 腸癌基因篩查

FDA與 2014年批準(zhǔn)了Cologuard腸癌篩查的產(chǎn)品上市，發(fā)表在了《新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志》（NEJM）上，CMS（醫(yī)療保險(xiǎn)）同步批準(zhǔn)了全國(guó)覆蓋，8月12 日Exact公司股價(jià)上揚(yáng)7％。使用Cologuard檢測(cè)CRC的靈敏度是92.8％，而FIT則為73.8％ (P =0 .002)但是特異性（沒(méi)有疾病呈陰性結(jié)果的個(gè)體比例）也必須被考慮在內(nèi)。這一點(diǎn)，可能FIT做的更好。使用FIT的特異性分別為94.9％t至 96.4％，而Cologuard則為86.6％ 至89.8％。。Cologuard和 FIT對(duì)于血紅蛋白檢測(cè)的表現(xiàn)相似，靈敏度分別為72.3％ 和 73.8％，特異性為94.7％ 和94.9％。北卡羅來(lái)納大學(xué)醫(yī)學(xué)教授David Ransohoff表示，結(jié)腸癌92％的檢出率對(duì)于非入侵性檢查是非常高的。因此陰性結(jié)果意味著沒(méi)有必要進(jìn)行進(jìn)一步的如結(jié)腸鏡的檢查。如此高靈敏度非入侵性的檢查手段對(duì)于結(jié)直腸癌的篩查具有重要意義。該項(xiàng)目的收費(fèi)599美元，CMS建議年齡在50-85歲的無(wú)癥狀人群或者有大腸癌或其他相關(guān)疾病家族史的人群每三年使用一次這個(gè)檢測(cè)。EvaluateMedTech預(yù)測(cè)檢測(cè)在2020年年銷(xiāo)售量可達(dá)到1200萬(wàn)，銷(xiāo)售額5.48億美元，如果Medicare 很早就將其納入醫(yī)保，收入有望更高。與FIT20倍的價(jià)格差異勢(shì)必會(huì)使部分醫(yī)生拒絕使用，迅速的普及需要更經(jīng)濟(jì)的價(jià)格，尤其是在發(fā)展中國(guó)家。

中國(guó)人腸癌的發(fā)病年齡比歐美人年輕12歲，目前國(guó)內(nèi)推薦的篩查方案是從40歲開(kāi)始對(duì)健康人群進(jìn)行腸癌篩查，中國(guó)人40歲以上的人群數(shù)量超過(guò)6億，市場(chǎng)巨大，有興趣的讀者可以關(guān)注、跟蹤。

相關(guān)報(bào)道：Epigenomics的血標(biāo)本大腸癌檢測(cè)產(chǎn)品被FDA拒絕。Epigenomics在獲悉Exact的產(chǎn)品獲批后表示，它“比以往任何時(shí)候”都更相信它的Epi proColon會(huì)最終獲批，這只是個(gè)時(shí)間問(wèn)題。公司將完成額外的試驗(yàn)，并最終贏得FDA的批準(zhǔn)。如果Epi proColon真的成功獲批，如果其費(fèi)用低于600美元，那么確實(shí)可以與Cologuard一較短長(zhǎng)。但是這至少得過(guò)好幾個(gè)月以后再說(shuō)，現(xiàn)在Exact 已經(jīng)獲勝。

注：Epigenomics已經(jīng)與中國(guó)公司博爾誠(chéng)(北京)科技有限公司簽署協(xié)議，后者獲得在中國(guó)市場(chǎng)開(kāi)發(fā)和銷(xiāo)售大腸癌篩檢產(chǎn)品的獨(dú)家授權(quán)，并啟動(dòng)了臨床試驗(yàn)，預(yù)計(jì)將在今年下半年完成試驗(yàn)并向中國(guó)食藥監(jiān)局提交申請(qǐng)。

4.應(yīng)用：

消化道疾病種類(lèi)眾多，在此不能一一道來(lái)，下面就常見(jiàn)的一些疾病和檢測(cè)方法做部分介紹。

4.1寄生蟲(chóng)

人類(lèi)寄生蟲(chóng)有196種，其中消化道寄生蟲(chóng)70多種，人類(lèi)感染主要是消化道寄生蟲(chóng)，尤其是線(xiàn)蟲(chóng)居多，全世界有寄生蟲(chóng)感染者約10億人，中國(guó)約近8千萬(wàn)人。近年來(lái)，由于寄生蟲(chóng)感染嚴(yán)重程度的下降，糞便中的蟲(chóng)卵數(shù)量較少，傳統(tǒng)的涂片法檢出率較低；線(xiàn)蟲(chóng)類(lèi)需要用加滕氏法，血吸蟲(chóng)需要用孵化法，肝吸蟲(chóng)則需要用飽和鹽水漂浮集卵法。這些方法操作復(fù)雜，需要有經(jīng)驗(yàn)的檢驗(yàn)人員操作，不適合大量標(biāo)本的檢查。而隱孢子蟲(chóng)感染（WHO公布的六大腹瀉原因之一，見(jiàn)中國(guó)疾病預(yù)防控制中心寄生蟲(chóng)病預(yù)防控制所網(wǎng)站）。由于沒(méi)有便捷的檢查手段，多數(shù)醫(yī)療機(jī)構(gòu)沒(méi)有開(kāi)展常規(guī)檢查，《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目目錄(2013年版)》中也沒(méi)有隱孢子蟲(chóng)的項(xiàng)目。中東地區(qū)，阿米巴痢疾是最重要的腹瀉原因之一，目前也停留在涂片鏡檢的狀態(tài)。（

4.2 輪狀病毒

全世界每年因輪狀病毒感染導(dǎo)致的嬰幼兒死亡的人數(shù)大約為900000人，其中大多數(shù)發(fā)生在發(fā)展中國(guó)家。在我國(guó)，0～2歲以?xún)?nèi)的嬰幼兒人數(shù)約為4000萬(wàn)人（含新生兒），每年大約有1000萬(wàn)嬰幼兒患輪狀病毒感染性胃腸炎，占嬰幼兒人數(shù)的1/4，是引起嬰幼兒嚴(yán)重腹瀉的最主要病原。

目前有多家輪狀病毒檢測(cè)試劑盒上市，膠體金方法和ELISA居多，主要檢測(cè)輪狀病毒A種，輪狀病毒有A、B、C、D、E、F、G等7種，人類(lèi)感染主要是A 種，也有感染B種或C種。動(dòng)物也會(huì)感染輪抓個(gè)病毒，感染動(dòng)物的輪狀病毒是有與感染人類(lèi)的輪狀病毒產(chǎn)生基因交換的潛在可能性。目前已經(jīng)證明感染動(dòng)物的輪狀病毒也可以感染人類(lèi)，感染途徑包括病毒的直接傳染以及提供感染人類(lèi)的病毒株一段或是數(shù)段的核糖核酸片段來(lái)進(jìn)行基因重整。

目前試劑廠商出品的輪狀病毒檢測(cè)試劑盒主要是檢測(cè)A種輪狀病毒病原體，對(duì)其他亞型沒(méi)有描述。眾所周知，輪狀病毒感染是自限性疾病，目前沒(méi)有特效藥物，主要依靠患者自體產(chǎn)生的特異性抗體痊愈，而檢測(cè)輪狀病毒抗體就可以監(jiān)測(cè)病人的病程，指導(dǎo)治療。

部分患兒腸道菌群紊亂會(huì)延續(xù)至腹瀉消退后3-5天，口服抗輪狀病毒免疫球蛋白具有良好的療效，抗輪狀病毒SIgA(分泌型IgA）的產(chǎn)生于腹瀉程度及病程息息相關(guān)，口服SIgA對(duì)內(nèi)源性SIgA生成的影響未見(jiàn)報(bào)道，SIgA在病程的前三天緩慢上升，特異性SIgA峰值的生成時(shí)間是第5天，與病程相符。鑒于以上資料，定量檢測(cè)糞便輪狀病毒和特異性SIgA含量嬰孩可以觀察患者病情的進(jìn)展，為臨床治療方案提供依據(jù)，可以減少患者不必要的用藥，腸道菌群紊亂缺乏實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，可以作為今后的研究方向。望能引起試劑廠商的重視。

輪狀病毒

4.3 FOB

糞便隱血是當(dāng)今胃腸道腫瘤普查中使用最廣泛而且評(píng)估最多的一項(xiàng)試驗(yàn)，并且具有快速簡(jiǎn)單、無(wú)痛苦、便于反復(fù)應(yīng)用等顯著優(yōu)點(diǎn)。對(duì)于一個(gè)反復(fù)多次糞便隱血試驗(yàn)陽(yáng)性的患者，無(wú)論年齡與性別，都應(yīng)該進(jìn)一步做胃腸道腫瘤的排查。

血紅蛋白在消化性潰瘍時(shí)陽(yáng)性率為40％～70％呈間斷陽(yáng)性，消化道癌癥時(shí)陽(yáng)性率可達(dá)95％，呈持續(xù)陽(yáng)性。其他各種疾病所致的消化道出血，均可呈陽(yáng)性反應(yīng)。

Park等和Levi等分別利用100 ng/mL和75 ng/mL的FOB臨界值，對(duì)結(jié)直腸癌FOB檢查進(jìn)行了研究；而在Logan關(guān)于50、75、100 ng/mL的FOB臨界值的研究中發(fā)現(xiàn)，較低的FOB臨界值對(duì)晚期腺瘤等具有較高的敏感性。FDA中膠體金免疫法FOB檢測(cè)試劑的注冊(cè)FOB臨界值濃度多低至50 ng/mL。美國(guó)消化學(xué)會(huì)推薦75 ng/mL的FOB臨界值。我國(guó)FOB的cut-off值多采用200ng/ml，臨床實(shí)際使用中，不同的cut-off值結(jié)果有一定的差異，50ng /mL、75 ng/mL與100ng/mL三者之間差異較小，與200ng/mL的結(jié)果差異較大。臨床應(yīng)用時(shí)還存在二種情況：一，部分檢驗(yàn)人員希望靈敏度不要漏檢，二，部分檢驗(yàn)人員希望靈敏度低，以免假陽(yáng)性多了患者找麻煩。希望能引起臨床醫(yī)生，檢驗(yàn)科人員與廠商的重視，建立適合我們國(guó)家的標(biāo)準(zhǔn)。

FOB篩查腸癌具有很高的靈敏度和更高的特異性，收費(fèi)僅10元人民幣，美國(guó)收費(fèi)為30美元。早期腸癌的治愈率是90％，歐美從50歲開(kāi)始篩查腸癌，我國(guó)患腸癌的年齡比歐美年輕了12歲，40歲以上的人群有6億多人，即使在上海這個(gè)中國(guó)經(jīng)濟(jì)和醫(yī)學(xué)最發(fā)達(dá)的城市，參加腸癌篩查的人也僅5％。我們應(yīng)該進(jìn)一步完善這個(gè)經(jīng)濟(jì)實(shí)用的檢測(cè)手段，造福人民。按照每人每二年檢測(cè)一次FOB計(jì)算每年的費(fèi)用為30億，深圳市的大病醫(yī)保費(fèi)用為每個(gè)癌癥病人25萬(wàn)，以此計(jì)算，每年新發(fā)腸癌 40萬(wàn)人，則每年為腸癌支出的治療費(fèi)用為1000億。我們應(yīng)該進(jìn)一步完善這個(gè)經(jīng)濟(jì)實(shí)用的檢測(cè)手段，造福人民，造福家庭、造福社會(huì)。

4.4糞便常規(guī)

糞便性狀檢查是很重要的臨床指標(biāo)，但氣味等檢查顯然不符合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的要求，必須有符合生物安全和更客觀的檢測(cè)手段替代（例如氣體傳感器），而不能依靠又經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)生的鼻子來(lái)判斷。

鏡檢是糞便檢查重要的手段，但糞便結(jié)構(gòu)異常復(fù)雜，需要有經(jīng)驗(yàn)的檢驗(yàn)醫(yī)生判讀，而且速度很慢，應(yīng)該尋找更適宜的技術(shù)逐步的替代鏡檢作為常規(guī)檢查的手段，例如用免疫學(xué)技術(shù)篩選隱孢子蟲(chóng)感染，陽(yáng)性者再用其他手段進(jìn)行確診。在工業(yè)自動(dòng)化技術(shù)還不能自動(dòng)識(shí)別篩選茶葉的時(shí)候，期望自動(dòng)化技術(shù)識(shí)別顯微鏡下的糞便結(jié)構(gòu)恐怕比人類(lèi)登上火星還難，無(wú)異于青銅器時(shí)代以做二踢腳的科技水平想造飛機(jī)導(dǎo)彈。

紅細(xì)胞：FOB檢查比紅細(xì)胞鏡檢有更高的靈敏度，尤其是消化道早期腫瘤微量出血時(shí)；轉(zhuǎn)鐵蛋白則對(duì)于上消化道出血有更高的診斷價(jià)值，上消化道出血時(shí)，紅細(xì)胞已經(jīng)被全部破壞，甚至血紅蛋白也檢測(cè)不到。

白細(xì)胞：白細(xì)胞是腸道炎癥的指標(biāo)，具有較高的臨床價(jià)值。但對(duì)于炎癥性腸病等鑒別診斷則不能為臨床提供依據(jù)；而鈣衛(wèi)蛋白、乳鐵蛋白等免疫學(xué)指標(biāo)則具有更高的臨床價(jià)值。

IBD和IBS彼此之間和其它腸道疾病如結(jié)腸癌，呈現(xiàn)出相似的癥狀，做出明確的診斷十分困難；而上述的免疫學(xué)檢查以及基因診斷則具有更高的臨床價(jià)值。

4.5鈣衛(wèi)蛋白

鈣衛(wèi)蛋白是一種雜合性的鈣結(jié)合蛋白，在鈣離子存在的情況下具有抗蛋白酶活性，在腸腔和外界環(huán)境中長(zhǎng)期保持穩(wěn)定，不被各種酶和細(xì)菌破壞；是中性粒細(xì)胞和活化的巨噬細(xì)胞胞質(zhì)中重要的蛋白質(zhì),可以作為急性炎性細(xì)胞活化的標(biāo)志物；其在糞便中極其穩(wěn)定，優(yōu)于以往的糞便標(biāo)志物。國(guó)外研究顯示UC活動(dòng)時(shí)糞便中鈣衛(wèi)蛋白含量明顯升高，能動(dòng)態(tài)反映UC活動(dòng)性變化，活動(dòng)期的組織學(xué)改變呈現(xiàn)出急、慢性炎癥共存的特征，中性粒細(xì)胞被認(rèn)為是區(qū)別UC急性與慢性炎癥的關(guān)鍵指標(biāo)，鈣衛(wèi)蛋白對(duì)腺瘤的敏感性為55％。該項(xiàng)目已經(jīng)進(jìn)入國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委印發(fā)《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目目錄（2013年版）》，瑞士 BühlmannLaboratories AG公司的CALPROTECTIN ELISA產(chǎn)品已獲得SFDA注冊(cè)證，由于操作繁瑣，各省市沒(méi)收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)，在各臨床機(jī)構(gòu)還沒(méi)有常規(guī)開(kāi)展。糞便鈣衛(wèi)蛋白檢測(cè)可以準(zhǔn)確區(qū)分IBD與IBS，有報(bào)道稱(chēng)通過(guò)鈣衛(wèi)蛋白檢測(cè)，使得67％的IBS患者不必進(jìn)行內(nèi)窺鏡檢查，減輕患者痛苦的同時(shí)，節(jié)約大量費(fèi)用。

羅氏申請(qǐng)的鈣衛(wèi)蛋白與血紅蛋白/觸珠蛋白復(fù)合物從糞便樣品中評(píng)價(jià)結(jié)腸直腸癌的方法獲中國(guó)專(zhuān)利授權(quán)。目前國(guó)內(nèi)外研究糞便檢測(cè)IBD產(chǎn)品的公司不多，國(guó)內(nèi)僅見(jiàn)蘇州和銳醫(yī)藥科技有限公司的產(chǎn)品在注冊(cè)中，該公司擁有多項(xiàng)IBD檢測(cè)產(chǎn)品的專(zhuān)利。蘇州和銳醫(yī)藥科技有限公和蘇州海路生物技術(shù)有限公司合作研發(fā)專(zhuān)用于糞便鈣衛(wèi)蛋白、乳鐵蛋白和艱難梭菌毒素蛋白等萃取的全自動(dòng)糞便蛋白萃取系統(tǒng)。

4.6 艱難梭菌毒素檢測(cè)

艱難梭菌是人類(lèi)腸道中的正常菌群，長(zhǎng)期使用廣譜抗生素或免疫抑制劑可導(dǎo)致該菌過(guò)度生長(zhǎng)，老人和體質(zhì)虛弱者為易感人群。該菌對(duì)氧十分敏感，很難分離培養(yǎng)，故得名。該菌釋放毒素A和B，引起艱難梭菌感染(Clostridiumdifficile infection，CDI)相關(guān)疾病。CDI易在醫(yī)院內(nèi)和社區(qū)環(huán)境中傳播，且難以控制，可引起30％的抗生素相關(guān)性腹瀉，50％～70％的抗生素相關(guān)性腸炎，90％～100％的抗生素相關(guān)性假膜性腸炎陽(yáng)，感染的病死率達(dá)17％。近年來(lái)，CDI的發(fā)生頻率和嚴(yán)重程度在世界各地呈上升趨勢(shì)，已經(jīng)成為令人擔(dān)憂(yōu)的健康問(wèn)題，以北美洲和歐洲更甚。據(jù)美國(guó)相關(guān)報(bào)道，該國(guó)2000--2005年CDI發(fā)病率從5.5／萬(wàn)增至11.2／萬(wàn)，病死率從2000年的1.2％增至2004年的2.2％。德國(guó)情況更加嚴(yán)重，2000---2007年僅南部的一個(gè)鄉(xiāng)村的病例數(shù)由95例增加到796例，毒素陽(yáng)性率由7.0％上升到 12.8％。即使在報(bào)道較少的亞洲國(guó)家，如新加坡、韓國(guó)也呈迅速上升趨勢(shì)。韓國(guó)的CDI病例數(shù)在逐年增加，產(chǎn)毒素的艱難梭茵檢出率從2002年的7％上升至2004年的50.3％。

CDI的確診依賴(lài)病原陽(yáng)性或假膜。實(shí)驗(yàn)診斷方法包括艱難梭菌的厭氧培養(yǎng)、細(xì)胞毒性試驗(yàn)、菌體及毒素抗原檢測(cè)、毒素基因擴(kuò)增檢測(cè)等，其中毒素檢測(cè)和培養(yǎng)細(xì)胞的毒素中和實(shí)驗(yàn)是目前實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)艱難梭茵的金標(biāo)準(zhǔn)。艱難梭菌毒素檢測(cè)方法主要有ELISA方法和熒光定量PCR方法，這兩種方法均需要對(duì)糞便樣本進(jìn)行前處理，提取其中的蛋白或者核酸。熒光定量PCR檢測(cè)方法比ELISA方法的靈敏度高1倍以上，特異性主要取決于探針的設(shè)計(jì)。據(jù)蘇州和銳向SFDA遞交的臨床試驗(yàn)報(bào)告，蘇州和銳研制的艱難梭菌毒素?zé)晒舛縋CR試劑特異性高達(dá)96％。

科普：炎癥性腸病(IBD)是一組發(fā)病機(jī)理不明確的腸道慢性非特異性炎癥性疾病，分為克羅恩病(CD)和潰瘍性結(jié)腸炎(UC)。CD好發(fā)于回結(jié)腸的慢性肉芽腫性炎癥，病變可累及胃腸道各部位，后期呈穿壁性炎癥，多呈節(jié)段性、非對(duì)稱(chēng)性分布，臨床主要表現(xiàn)為腹痛、腹瀉、瘺管、肛門(mén)病變等。UC是一種慢性非特異性結(jié)腸炎癥，病變主要發(fā)生在結(jié)腸黏膜和黏膜下層，范圍多自遠(yuǎn)段結(jié)腸開(kāi)始，可逆行向近段發(fā)展，甚至累及全結(jié)腸及末段回腸，呈連續(xù)性分布，臨床主要表現(xiàn)為腹瀉、腹痛和黏液膿血便。由于CD和UC，IBD與非IBD的治療方法不同，因此需要早期鑒別診斷。根據(jù)國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道，近5年的病例數(shù)是上世紀(jì)90年代同期的8 倍，IBD已逐漸成為我國(guó)消化科的常見(jiàn)病，很多老百姓口中的“慢性腸炎”很可能就是IBD。

5.展望

糞便檢測(cè)與消化道疾病以及一些全身疾病密切相關(guān)，對(duì)于在消化道腫瘤，消化道傳染病，消化道寄生蟲(chóng)等領(lǐng)域的應(yīng)用具有廣闊的前途，市場(chǎng)巨大，未來(lái)應(yīng)該會(huì)占據(jù) IVD市場(chǎng)的25-30％以上。未來(lái)十年，糞便檢測(cè)國(guó)內(nèi)市場(chǎng)或許會(huì)達(dá)到數(shù)百億的市場(chǎng)份額，而全球市場(chǎng)或許會(huì)達(dá)到數(shù)百億美元的市場(chǎng)；屆時(shí)會(huì)產(chǎn)生一批糞便檢測(cè)細(xì)分市場(chǎng)的一些龍頭企業(yè)。近幾年來(lái)，關(guān)于腸道微生物菌群的研究也成為熱門(mén)的話(huà)題，腸道菌群有一千萬(wàn)億的細(xì)菌，不僅僅。響我們的健康，甚至影響我們的思維。許多公司看到糞便分析的前景，紛紛上馬，既是好事也令人擔(dān)憂(yōu)，一些公司盲目上馬，不認(rèn)真研究市場(chǎng)和產(chǎn)品，抄襲其他公司的科研成果，擾亂市場(chǎng)，在國(guó)家越來(lái)越重視知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)的今天，其人力物力的投入極可能付之東流。

糞便標(biāo)本與血液、尿液標(biāo)本一樣，可以用不同的檢測(cè)手段（例如鏡檢，生化，免疫，分子診斷等等）去檢測(cè)不同的疾病標(biāo)志物。

前提是糞便標(biāo)本的前處理，由于不同的疾病檢測(cè)目標(biāo)物不一樣，前處理的方法就不一樣。例如鏡檢對(duì)糞便標(biāo)本的處理與某些免疫學(xué)方法或分子診斷對(duì)糞便標(biāo)本的處理要求就完全不一樣，所以不能期望用一臺(tái)儀器解決所有的問(wèn)題；而是類(lèi)似血液檢測(cè)，有血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，生化分析儀，酶免方法，膠體金方法，化學(xué)發(fā)光，PCR方法等等。有一個(gè)國(guó)家重大專(zhuān)項(xiàng)的項(xiàng)目在完成后，由于沒(méi)有配套的糞便標(biāo)本前處理的裝置，臨床不愿意使用。

選定適宜的檢測(cè)方法也很重要，不要用高射炮打蚊子，膠體金或生化可以解決的，就不用發(fā)光免疫或PCR，但對(duì)于某些微量物質(zhì)的檢驗(yàn)，當(dāng)然要選擇高靈敏度的檢測(cè)方法（見(jiàn)圖：部分免疫學(xué)方法靈敏度）；更不能用一些低靈敏度的方法卻聲稱(chēng)與電化學(xué)發(fā)光一致。要用不斷出現(xiàn)的新技術(shù)去替代傳統(tǒng)的一些技術(shù)，建立新的標(biāo)準(zhǔn)體系；不能沿襲和照抄半個(gè)多世紀(jì)沒(méi)有修改的《臨床檢驗(yàn)規(guī)程》；但也不能為了創(chuàng)新而創(chuàng)新，必須本著科學(xué)求是的精神，摒棄偽科學(xué)，一切從為臨床服務(wù)出發(fā)，才能真正做到基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)橋梁的作用，才能真正被市場(chǎng)所認(rèn)可。不然，即使短時(shí)間贏的部分市場(chǎng)，也只能是曇花一現(xiàn)。

在現(xiàn)代科技與生命醫(yī)學(xué)科學(xué)的快速發(fā)展催生下，自動(dòng)糞便檢測(cè)的研究已取得巨大的進(jìn)步，尤其是蘇州海路生物技術(shù)有限公司推出的全自動(dòng)糞便分析儀，該儀器可以說(shuō)是由我國(guó)科研人員原創(chuàng)的第一臺(tái)IVD儀器，也是世界上第一臺(tái)真正意義上的全自動(dòng)糞便分析儀，這是科研人員結(jié)合臨床實(shí)際，不斷探索更靈敏、特異、便捷和經(jīng)濟(jì)的診斷方法，提高糞便檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室診斷水平，為消化道及相通器官疾病的研究和實(shí)驗(yàn)診斷提供先進(jìn)和準(zhǔn)確的科學(xué)手段的結(jié)果?？茖W(xué)永無(wú)止境，伴隨著分子診斷技術(shù)和色譜、質(zhì)譜、測(cè)序等分析技術(shù)的進(jìn)步，將為糞便檢測(cè)又打開(kāi)一扇新的大門(mén)。